細胞自噬
發(fā)布時間 ：2018-01-03
細胞自噬檢測
細胞自噬是真核生物中進化保守的對細胞內(nèi)物質(zhì)進行周轉(zhuǎn)的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬小泡包裹后，送入溶酶體(動物）或液泡（酵母和植物）中進行降解并得以循環(huán)利用。
自噬形成時，胞漿型LC3（即LC3-I）會酶解掉一小段多肽，轉(zhuǎn)變?yōu)椋ㄗ允审w）膜型（即LC3-II），因此LC3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。
在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成：利用LC3在自噬形成過程中發(fā)生聚集的現(xiàn)象開發(fā)出了此技術(shù)。無自噬時，GFP-LC3融合蛋白彌散在胞漿中；自噬形成時，GFP-LC3融合蛋白轉(zhuǎn)位至自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個明亮的綠色熒光斑點，一個斑點相當于一個自噬體，可以通過計數(shù)來評價自噬活性的高低。
LC3抗體對LC3-II親和力高，兩種方法可結(jié)合使用。
自噬形成時，胞漿型LC3（即LC3-I）會酶解掉一小段多肽，轉(zhuǎn)變?yōu)椋ㄗ允审w）膜型（即LC3-II），因此LC3-II/I比值的大小可估計自噬水平的高低。
在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成：利用LC3在自噬形成過程中發(fā)生聚集的現(xiàn)象開發(fā)出了此技術(shù)。無自噬時，GFP-LC3融合蛋白彌散在胞漿中；自噬形成時，GFP-LC3融合蛋白轉(zhuǎn)位至自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個明亮的綠色熒光斑點，一個斑點相當于一個自噬體，可以通過計數(shù)來評價自噬活性的高低。
LC3抗體對LC3-II親和力高，兩種方法可結(jié)合使用。
客戶提供
① 細胞：大于106；
② 抗體；
伯信提供
① 實驗報告（實驗儀器、試劑、方法、結(jié)果、結(jié)論）。
