IF-FISH
發布時間 ：2017-05-31
可用于已知基因和蛋白的共定位
FISH(fluorescence in situ hybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是：如果待檢測的細胞或組織切片上的靶核酸與所用的核酸探針是同源互補的，二者經變性-退火-復性，即可形成靶核酸與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素或直接標記熒光素，可利用該報告分子與熒光素標記的特異親和素之間的免疫化學反應或直接經熒光檢測體系在鏡下對待測核酸(mRNA、lncRNA、circRNA、miRNA)進行定性、半定量或相對定位分析的一種實驗方法。
免疫熒光(IF)：以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術。用于檢測或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質結合，用于檢測或定位抗體。
技術流程
客戶提供
① 組織：新鮮或固定（10%中性甲醛、4%多聚甲醛）組織樣本；
② 細胞：新鮮（大于106）或固定（10%中性甲醛、4%多聚甲醛）細胞樣本；
③ 切片：石蠟切片，冰凍切片以及細胞爬片，涂片；
④ 實驗信息：基因名稱及ID；
⑤ 實驗材料：一抗；
伯信提供
① 染色后的切片；
② 探針序列；
③ 電子圖片（熒光顯微鏡或共聚焦拍照）；
④ 實驗報告（實驗儀器、試劑、方法、結果、結論）。
結果實例
IF-FISH 人胰腺癌細胞 circRNA（綠）+目的蛋白（紅） 200×
