酵母雙雜交系統(tǒng)（Yeast two-hybrid system）的建立基于對(duì)真核生物調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始過程的認(rèn)識(shí)。酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4含兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：DNA結(jié)合功能域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域，前者可識(shí)別DNA上的特異序列，并使轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域定位于所調(diào)節(jié)基因的上游，后者同轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的其他成分作用，啟動(dòng)相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。
將編碼DNA結(jié)合功能域的基因與已知誘餌蛋白質(zhì)基因構(gòu)建在同一個(gè)表達(dá)載體上，將編碼DNA轉(zhuǎn)錄激活域的基因和與已知捕獲蛋白質(zhì)基因構(gòu)建在同一個(gè)表達(dá)載體上，同時(shí)將上述兩種載體轉(zhuǎn)化改造后的酵母。當(dāng)兩種載體所表達(dá)的融合蛋白質(zhì)能夠相互作用時(shí)，功能重建的反式作用因子能夠激活酵母基因組中的報(bào)告基因，從而通過功能互補(bǔ)和顯色反應(yīng)確定蛋白質(zhì)間的互作關(guān)系。
客戶提供
① 目標(biāo)蛋白質(zhì)名稱、物種信息、基因 ID（驗(yàn)證性）；
② 誘餌蛋白質(zhì)名稱、物種信息、基因 ID、組織或細(xì)胞（探究性）；
伯信提供
① 實(shí)驗(yàn)報(bào)告（實(shí)驗(yàn)儀器、試劑、方法、結(jié)果、結(jié)論）；
② 文庫（探究性）。
