GST pulldown
發布時間 :2016-07-08
GST pulldown實驗是一個有效驗證酵母雙雜交系統的體外試驗技術。
GST pulldown實驗是一個有效驗證酵母雙雜交系統的體外試驗技術。將靶蛋白質-GST融合蛋白質親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白質親和的支撐物,充當一種“誘餌蛋白質”,目的蛋白質溶液過柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白質(目的蛋白質)”,洗脫結合物通過SDS-PAGE電泳分離,最后經Western Blot,從而證實兩種蛋白質間的相互作用;“誘餌蛋白質”和“捕獲蛋白質”均可通過細胞裂解物、純化的蛋白質、表達系統以及體外轉錄翻譯系統等方法獲得。

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① 互作蛋白質名稱、基因 ID、物種信息;
② 誘餌蛋白質及捕獲蛋白質表達載體;
③ 一抗;
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① PAGE電泳電子圖片;
② Western Blot原始圖片及鑒定結果;
③ 實驗報告(實驗儀器、試劑、方法、結果、結論)。



